В 1988 г. нами предложен метод окраски выделенных на питательных средах культур L-форм возбудителя туберкулеза, гематологическими красителями (окраска по Романовскому-Гимзе), что в значительной мере повышает точность лабораторных исследований и расширяет их диагностические возможности.
Преобладающим элементом в культурах L-форм являются зернистые безъядерные шаровидные структуры диаметром 5 — 7 мкм, среди которых выявляются в основном 2 типа шаров: а) плотные, гомогенные, интенсивно окрашенные в синий цвет шаровидные образования; б) бледные, голубовато-сиреневые, вакуолизированные шаровидные структуры.
В целях определения наличия у указанных структур характерного для микобактерий признака кислотоустойчивости была использована докраска препаратов по классическому методу Циля-Нильсена.
Указанный метод применен нами для выявления измененных форм возбудителя туберкулеза в клиническом материале от 72 больных. Анализ полученных результатов показал, что предложенный метод окраски может с успехом применяться не только для обнаружения L-форм микобактерий в чистой культуре, но и позволяет выявлять их непосредственно в патологическом материале, причем морфология L-трансформированных элементов была идентична их морфологии в чистых культурах.
Рост микобактерий туберкулеза в бактериальной и L-трансформированной форме был получен из 43 проб материала, цитологически возбудитель был обнаружен в 39, причем в 8 из них при посеве и бактериоскопии были выявлены только бактериальные формы возбудителя, а из 35 проб, давших рост L-форм, они наблюдались при окраске по Романовскому-Гимзе только в 31. Все 4 отрицательных результата были получены при исследовании мокроты. В 5 наблюдениях выявленные микроскопически L-варианты микобактерий не дали роста при посеве.
Дополнительная докраска мазков по Цилю-Нильсену позволила в 8 наблюдениях констатировать наличие кислотоустойчивости у L-форм, что свидетельствовало об их высокой потенциальной способности к реверсии и было в последующем подтверждено при пассажах.