У больных неспецифическими заболеваниями органов дыхания и туберкулезом легких исследованию подвергали утренние порции мокроты, бронхиальные смывы, экссудаты, мазки из ран, зева. На теплые питательные среды (подогретые в термостате) высевали (0,1 мл) разведенный материал (10~4 и 10~6). Использовали плотную агаровую среду, приготовленную на гидролизате Хоттингера (аминный азот 170 мг%; рН=7,6) с добавлением 2,5 % дефибринированной нативной крови барана, эту же среду с нативной кровью человека (на 6,5 % цитрате), среду ВНИИП, содержащую наряду с гидролизатом Хоттингенра — гидролизат бычьих сердец и экстракт пекарских дрожжей. Кроме того, использовали специальный агар для гемофильных бактерий производства ЧССР, на основе которого готовили агар с вареной кровью и такой же на основе агара Хоттингера и гидролизата бычьих сердец.
Наиболее элективной для всех ассоциаций микробов, встречающихся в разнообразном патологическом материале, в том числе и для бактерий рода Haemophilus, явилась среда ВНИИП. Через сутки инкубации при 37 °С в атмосфере 10 % С02 отмечался пышный рост мелких, средних и крупных прозрачных, сочных колоний, легко снимающихся со среды, очень мягкой консистенции и разнообразной формы. Гемофилам присущ большой полиморфизм, кучность расположения и полярность окрашивания. После микроскопии колонии гемофилов отсевали на секторы чашки Петри или косяки для накопления биомассы, чтобы впоследствии определить чувствительность к антибиотикам. В дальнейшем по большому набору биохимических тестов изучали их свойства.